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  • 分 子 式: C31H34FNO8
  • 分 子 量: 567.60
  • 外      观: 红色~红紫色固体
  • 别      名:
  • 纯      度: ≧90 %(HPLC)
  • 储存条件: 0-5
  • 运输条件: 室温
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SPiDER-βGal
货号: SG02
(2S,3R,4S,5R,6R)-2-{[3'-(Diethylamino)-5'-(fluoromethyl)-3H-spiro(isobenzofuran-1,9'-xanthen)-6'-yl]oxy}-6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5-triol
β-半乳糖苷酶荧光标记试剂
CAS号: 1824699-57-1
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20 μg x 34580期货

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SPiDER-βGal(SG02)组织染色说明集

 

    本说明集适用于SPiDER-βGal浓度为10-20 μM时的使用。对于果蝇组织,也有SPiDER-βGal浓度为1 μM时的使用实例。下述为用20 μg/tube配制1 μM10 μM SPiDER-βGal溶液(DMSO浓度为0.1 %)的方法。

 

*  配制溶液

Ø  1 μM SPiDER-βGal溶液(DMSO浓度为0.1 %)

    20 μg/tube中加入35 μl DMSO,配制1 mM DMSO 储备溶液。将1 mM DMSO 储备溶液用PBSHBSS等稀释,配制1 μM SPiDER-βGal溶液(DMSO浓度为0.1 %)。

Ø  10 μM SPiDER-βGal溶液(DMSO浓度为0.1 %)

    20 μg/tube中加入3.5 μl DMSO,配制10 mM DMSO 储备溶液。将10 mM DMSO 储备溶液用PBSHBSS等稀释,配制10 μM SPiDER-βGal溶液(DMSO浓度为0.1 %)。

 

*  果蝇组织

Ø  直接染色

1) 从果蝇幼虫取出lacZ表达组织后,在含有10-20 μM SPiDER-βGal的培养基中室温培养20-30分钟。

ü  如需要同时染色细胞核,同时加入16 μM Hoechst 33342

ü  染色后也可以用4 PFA固定。

Ø  固定组织染色

1) 从果蝇幼虫取出lacZ表达组织后,通过在含有4 PFAPBS中培养20分钟固定。

2) PBS洗涤后,在含有10-20 μM SPiDER-βGalPBS中室温培养20-30分钟。

Ø  与免疫染色的并用

1) 从果蝇幼虫取出lacZ表达组织后,通过在含有4 PFAPBS中培养20分钟固定。

2) PBS-T洗涤5分钟×3次后,进行封闭。

3) PBS-T溶解一抗、培养30分钟后,用PBS-T洗涤5分钟×3次。

4) 在含有10 μM SPiDER-βGal16 μM Hoechst 33342及二抗的PBS中培养30分钟后,用PBS洗涤5分钟×3次。

 

*  小鼠组织

Ø  直接染色

1) 从小鼠取出lacZ表达组织,切成合适大小。

2) 加入含有10-20 μM SPiDER-βGalOPTI-MEM中在37 5 CO2的条件下培养。

ü  染色后也可以用4 PFA固定。

Ø  固定组织染色

1) 从小鼠取出lacZ表达组织,切成合适大小。

2) 在含有1 PFA0.2 GA的固定液中固定后,在含有10-20 μM SPiDER-βGalPBS中室温培养60分钟。