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-SulfoBiotics- HSip-1 DA
货号: SB22

硫化氢检测试剂
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50ug1910现货

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硫化氢 (H2S) 在舒张血管,保护细胞和调节胰岛素分泌方面具有重要的生理作用已经得到广泛的认可。 H2S被认为是一种类似于NO和CO的气体信号分子,但在生理条件下大约80%的H2S是以HS-的状态存在的 (pKa=7)。HS- 很容易转变为各种过硫化物和多硫化物。 -SulfoBiotics- HSip-1 是一种新的特异性检测H2S的荧光探针,当和H2S反应时会发出较强的绿色荧光。 -SulfoBiotics- HSip-1 DA可以穿透细胞膜检测细胞内的H2S。
图1.  HSip-1 和 HSip-1 DA的化学结构    图2. HSip-1和H2S反应的激发、发射光谱图
 
储存条件:
- HSip-1 DA 在0-5℃保存。
 
所需的设备和材料:
- Dimethyl Sulfoxide (DMSO)  -无血清培养基
- HBSS      -PBS
- 移液器
 
 
 
溶液制备:
制备10 mmol/l HSip-1储存液
加117 μl超纯水至含有1 mg HSip-1的管子中,用移液器吹打溶解。
*配制好的溶液请在-20℃保存,可以保存1个月。
制备1 mmol/l HSip-1 DA储存液
加53 μl DMSO至含有50 μg HSip-1 DA的管子中,用移液器吹打溶解。
*配制好的溶液请在-20℃保存,可以保存1个月。
 
实验例:
 用HSip-1 DA检测硫化氢的荧光成像
1) 在μ-slide 8 well (ibidi)中接种HeLa细胞,并在37℃,5%的CO2培养箱中过夜培养。
2) 更换培养基,用无血清的MEM培养基清洗细胞2次。
3) 用无血清的MEM培养基稀释1 mmol/l 的HSip-1 DA储存液,制成5 μmol/l 的HSip-1 DA工作液。
*请根据细胞种类优化HSip-1 DA的终浓度。
4) 在细胞中加入200 μl 5 μmol/l的 HSip-1 DA工作液,并在37℃,5%的CO2培养箱中培养30 min。
5) 去除上清液,用HBSS清洗细胞2次。
6) 在每孔中加入200 μl 200 μmol/l 的Na2S溶液,并在37℃,5%的CO2培养箱中培养30 min。
7) 去除上清液,用HBSS清洗细胞2次。
8) 加入200 μl HBSS,用共聚焦荧光显微镜观察细胞。
    图3. 用HSip-1 DA检测HeLa细胞(经过Na2S处理)中的硫化氢
(A: Control, B: 用200 μmol/l Na2S 处理)

*本产品是在东京大学大学院 药学系研究科 长野哲雄博士和花冈健二郎博士的指导下开发成功的。
 
 
 
1) K. Sasakura, K. Hanaoka, N. Shibuya, Y. Mikami, Y. Kimura, T. Komatsu, T. Ueno, T. Terai, H. Kimura, and T. Nagano, “Development of a Highly Selective Fluorescence Probe for Hydrogen Sulfide”, J. Am. Chem. Soc., 2011, 133, 18003.